Allergiske diagnostiske tests

Allergiske diagnostiske tests

Allergidiagnostiske metoder. De udføres, efter at en række mistænkte allergener er blevet identificeret gennem en grundig historieudtagning. Prøver udføres uden for faser af forværring af sygdommen og ikke tidligere end 2-3 uger senere. efter en akut allergisk reaktion, fordi kroppens følsomhed over for allergenet falder i løbet af denne tid.

Skel mellem hud og provokerende A. d. P. Hudtest er baseret på identifikation af specifik sensibilisering af kroppen ved at indføre et allergen gennem huden. Samtidig vurderes størrelsen og arten af ​​den udviklende inflammatoriske reaktion. Skel mellem kvalitativ og kvantitativ hudtest. Ved hjælp af hudtest af høj kvalitet bestemmes tilstedeværelsen eller fraværet af sensibilisering over for dette allergen. Disse tests bruges til diagnosticering af allergiske såvel som nogle infektiøs-allergiske (tuberkulose, brucellose osv.) Og parasitære (helminthiasis) sygdomme. Kvantitative hudtest giver en idé om graden af ​​sensibilisering af kroppen. Med deres hjælp bestemmes minimumskoncentrationen af ​​et specifikt allergen, hvor det forårsager en synlig allergisk reaktion i en sensibiliseret organisme. Denne metode kaldes allergititrering. Med sin hjælp indstilles dosis af allergenet, hvormed det er muligt at starte specifik hyposensibilisering (fald i sensibiliseringsniveauet) ved at indføre allergenet i kroppen.

Afhængig af den anvendte teknik kan hudtest være direkte eller indirekte. I direkte hudtest injiceres allergenet intradermalt eller ved at beskadige epidermis ved at stikke eller ridse. Ved direkte dråbtest og påføring af hud påføres et allergen (normalt et lægemiddel eller et stof) på intakt hud i form af en dråbe eller applikation. Et hudrespons betragtes som positivt, når der forekommer hyperæmi, infiltration eller blærer. Det kan forekomme inden for 20 minutter (øjeblikkelig reaktion), efter 6-12 timer (reaktion af overgangstype), efter 24-48 timer (forsinket reaktion). Typen af ​​hudrespons afhænger af arten af ​​den allergiske reaktions immunologiske mekanisme (se Allergi). Blandt direkte hudtest af forskellige typer er den mest følsomme intradermal efterfulgt af ardannelse, injektion, påføring, dryp.

Indirekte hudtest inkluderer Prausnitz-Küstner-reaktionen, hvor patientens blodserum injiceres intradermalt i en sund person, og efter at antistofferne er fikseret på modtagerens hud (efter 24 timer) injiceres allergenet på samme sted. Udviklingen af ​​en lokal hudreaktion vurderes på tilstedeværelsen af ​​antistoffer-reagenser i testserumet. Denne reaktion udelukker ikke muligheden for at overføre patogenet med blodserumet i nærvær af en latent infektion i donoren, og dets anvendelse er derfor begrænset. Det er mest hensigtsmæssigt at detektere reagin-antistoffer ved hjælp af forskellige immunreaktioner - enzymimmunassay osv. (Se Immunologiske forskningsmetoder). Valget af hudtesttype afhænger af sygdommen, den forventede grad af følsomhed, allergenets art og også af hudens reaktivitet. At tage nogle medikamenter (antihistaminer, beroligende midler) reducerer hudens reaktivitet dramatisk, derfor er det nødvendigt at afstå fra at tage disse medikamenter i 5-7 dage før en allergisk undersøgelse.

Ved diagnosen allergiske sygdomme kan man ikke helt stole på hudtest og overvurdere deres resultater. Hudtestning og vurdering af deres resultater udføres kun af specielt uddannet medicinsk personale.

Hvis der er en uoverensstemmelse mellem dataene om allergisk historie og resultaterne af hudtest i perioden med remission, vises provokerende tests. Disse tests er baseret på reproduktion af allergiske reaktioner ved introduktion af et allergen i et organ eller væv, hvis nederlag fører i billedet af sygdommen. Der er provokerende test for konjunktival, næse og indånding. Konjunktiv provokerende test udføres ved at indgyde allergenet i den nedre bindehinde. Reaktionen betragtes som positiv, når konjunktival hyperæmi, lakrimation og kløe i øjenlågene vises. En nasal provokerende test udføres for allergisk rhinitis og høfeber: et allergen indføres i den ene halvdel af næsen og en kontrolvæske i den anden. Reaktionen betragtes som positiv, hvis der er vanskeligheder med nasal vejrtrækning og kløe på siden af ​​allergenets instillation. En inhalerende provokerende test bruges til etiologisk diagnose af bronchial astma: ved hjælp af en aerosolnebulisator inhalerer patienten en opløsning af allergenet gennem munden. Reaktionen betragtes som positiv, hvis lungernes vitale kapacitet reduceres med mere end 15%.

De provokerende tests inkluderer også kulde- og varmetest, der anvendes til kold og varm urticaria (Urticaria). I mangel af klare tegn på sygdommen udføres en provokerende test for eksponering. Det er baseret på patientens direkte kontakt med det mistænkte allergen i det miljø, hvor patienten normalt findes. Det modsatte af denne test er elimineringstesten - udelukkelse af det påståede allergen fra kosten, overførsel af patienten, der lider af husholdningsallergi, til den såkaldte ikke-allergifremkaldende afdeling osv. Leukocytopeniske og trombocytopeniske provokerende tests anvendes til diagnosticering af fødevareallergi (fødevareallergi) og lægemiddelallergi) (... Disse tests er baseret på et fald i antallet af leukocytter og blodplader i blodet efter administration af testallergenet til patienten..

Bibliografi: Klinisk immunologi og allergologi, red. L. Yeager, overs. med det., t. 1-3, M., 1986; Pytskiy V.I., Adrianova N.V. og Artomasov A. I allergiske sygdomme, M., 1984; Modern Practical Allergology, red. HELVEDE. Ado og A.A. Polnera, M., 1963.

En allergisk metode til diagnose af infektiøse sygdomme er

Allergiske tests - biologiske reaktioner til diagnose af en række sygdomme baseret på kroppens øgede følsomhed forårsaget af et allergen.

I mange smitsomme sygdomme udvikler en øget følsomhed i kroppen for patogener og deres metaboliske produkter på grund af aktivering af cellulær immunitet. Allergiske tests, der anvendes til diagnosticering af bakterielle, virale, protozoale infektioner, mykoser og helminthiasis er baseret på dette. Allergiske tests har specificitet, men de er ofte positive hos dem, der har været syge og vaccineret.

Alle allergiske tests er opdelt i to grupper - in vivo og in vitro test.

Allergisk metode til diagnose af infektiøse sygdomme

I en række smitsomme sygdomme bliver kroppen overfølsom over for de bakterier, der forårsager allergener. Dette fænomen hjælper med at etablere en etiologisk diagnose. I nogle tilfælde dannes en specifik bakteriel allergi tidligt i de første dage af sygdommen, som bruges til den tidlige diagnose af tularæmi (intradermal allergisk test med tularin bliver positiv på 2. - 3. dag).

I andre tilfælde forekommer den allergiske omstrukturering af kroppen senere, og identifikationen af ​​en specifik allergi kan bruges med henblik på tilbagevirkende diagnose. Metoder til hyposensibilisering af kroppen ved hjælp af passende allergener anvendes til behandling af patienter med visse kroniske former for sygdomme. Den terapeutiske anvendelse af bakterielle allergener er berettiget i tilfælde, hvor antibiotikabehandling og andre behandlingsmetoder ikke lykkes, og sygdommen får et kronisk tilbagevendende forløb.

Disse nosologier inkluderer i øjeblikket en række smitsomme sygdomme, der giver kroniske former for ikke-lungetuberkulose (skade på nethinden), brucellose (tilbagevendende myokarditis), toxoplasmose (beskadigelse af bevægeapparatet).

Allergiske tests (kutan og intradermal) har fået universel anerkendelse i diagnosen bakterielle infektioner såsom tularæmi, brucellose (Burne-test), tuberkulose (Pirquet's kutane test og Mantoux's intradermale test), toxoplasmose, svampe hudlæsioner, kirtler og rickettsioses (Q feber). Den nemmeste at udføre er en kutan allergisk test i sammenligning med intradermal og andre metoder til allergenadministration.

Teknikken til en intradermal allergisk test er som følger: En dråbe af et allergen påføres flexoroverfladen på underarmen eller på skulderhuden (efter behandling med 70% alkohol) og gennem den udføres en let ardannelse (uden udseende af blod!). En positiv test (efter 24 og 48 timer) i nærvær af sensibilisering af kroppen til det injicerede allergen manifesteres ved en inflammatorisk reaktion af varierende intensitet: rødme, hævelse, blærer, nogle gange med en følelse af lokal kløe og brændende.

Reaktionens sværhedsgrad og dens varighed afhænger af sensibiliseringstilstanden i kroppen og koncentrationen af ​​det bakterielle allergen (for eksempel ved diagnosticering af tuberkulose bør den ikke være højere end 1:10 000 (!) For at undgå fokale reaktioner i lungerne, fortsætter med ødelæggelse (!) Af lungevæv).

Diagnosticering af virusinfektioner

Laboratoriediagnosen for virusinfektioner er baseret på påvisning af virussen og antistoffer mod den. Materialet til forskning er de biologiske væsker i kroppen og vævet, hvor virussen findes i de største mængder. Afhængig af sygdommens art og stadium undersøges blod, cerebrospinalvæske, udslip af bindehinden, urinrøret, livmoderhalsen, nasopharyngeal slim, afføring, urin og stykker organvæv opnået ved hjælp af en biopsi eller fra et lig.

Til virologiske studier injiceres materiale fra en patient i forskellige laboratoriedyr i kyllingembryoner og vævskulturer; valget af materiale og forskningsmetode bestemmes af virusets tropisme, der er forbundet med forskellige virusinfektioner, og dets evne til at formere sig in vivo og in vitro. Virusidentifikation udføres ved hjælp af specifikke metoder ved anvendelse af serologiske tests.

I de senere år er polymerasekædereaktion (PCR) blevet brugt til diagnostik; indikationsområdet for forskellige vira ved denne metode udvides hurtigt. I øjeblikket er virologisk diagnostik af hepatitis A, B, C, D, G, TTV blevet udviklet; bestemmelse af herpesvira, cytomegalovirus, HIV osv. Bestem ikke kun deres tilstedeværelse i testmaterialet (blod osv.), men også antallet af virale partikler (den såkaldte "viral load" - graden af ​​viræmi og virusreplikation), hvilket ikke kun er vigtigt for diagnostik, men også til dynamisk overvågning af sygdomsforløbet og til vurdering af effektiviteten af ​​antiviral behandling (mængden af ​​virus falder, indtil den forsvinder).

Sammen med PCR bevarer nogle rutinemæssige laboratoriemetoder til diagnosticering af virusinfektioner deres betydning: direkte mikroskopi af næsepinde til bestemmelse af DNA- og RNA-vira; reaktion af immunfluorescens (RIF), indirekte immunfluorescens (RNIF) ved diagnosen influenza og andre akutte respiratoriske virusinfektioner; isolering af rene kulturer af influenzavirus for at bestemme deres type.

RSK bruges i vid udstrækning til at bestemme antistoffets titre hos patienter i løbet af sygdommen; hæmagglutinationsinhiberingsreaktion (RTGA), som gør det muligt at bestemme graden af ​​kroppens specifikke immunologiske respons; neutraliseringsreaktioner, udfældning i agar og mange andre specielle virologiske metoder anvendes også.

Betydningen af ​​serologiske og allergiske metoder i diagnosen infektiøse sygdomme.

Den serologiske metode er baseret på bestemmelse af specifikke antistoffer i blodet til de tilsvarende patogener ved anvendelse af forskellige reaktioner (agglutination, passiv hæmagglutination osv.). Serologiske reaktioner anvendes til følgende formål: 1) ifølge et kendt antigen (diagnosticum) bestemmes indholdet af antistoffer mod det i serum, 2) ifølge et kendt antistof (diagnostisk serum) bestemmes et mikrobielt antigen i materialet eller identificeres et isoleret patogen.

Den allergiske metode er baseret på påvisning af en øget følsomhed af makroorganismen over for visse patogener af infektiøse sygdomme eller deres metaboliske produkter. Til allergiske tests anvendes stoffer, der kaldes allergener..

5. Hovedgrupperne af bakteriens patogenicitetsfaktorer:

1) adhæsionsfaktorer,

2) faktorer for invasion,

3) faktorer, der forhindrer fagocytose,

4) faktorer, der undertrykker fagocytose,

5) enzymer af "forsvar og aggression",

6) mikrobielle toksiner (endo- og exotoksiner).

6. Hvilke faktorer af patogenicitet forhindrer fagocytose, og hvad hæmmer fagocytose?

Faktorer, der forhindrer fagocytose, blokerer trin 1 og 2 i fagocytose. Dette er en kapsel, komponenter i cellevæggen - plasmacoagulase, peptidoglycan, protein A, protein M, teichoinsyrer osv. Disse faktorer maskerer enten bakterier (hyaluronsyre i kapslen) eller undertrykker fagocytternes aktivitet.

Faktorer, der undertrykker fagocytose, blokerer den oxidative burst, hvilket fører til ufuldstændig fagocytose. Dette er en mikrokapsel, levetiden for bakterier, V-antigener osv..

Faktorer for adhæsion og kolonisering af bakterier, deres art og betydning.

Vedhæftnings- og koloniseringsfaktorer er de indledende, udløsende mekanismer for sygdommen. Med deres hjælp genkender bakterier receptorer på cellemembraner, styrker og koloniserer celler. Disse faktorer inkluderer komponenterne i cellevæggen: fimbriae (korte udvækst), ydre membranproteiner, lipopolysaccharid, peptidoglycan, teichoesyrer (G +).

8. Hvad er faktorerne for invasion? Hvordan de kan repræsenteres?

Invasion faktorer er faktorer, hvormed bakterier kommer ind i cellen. I G - kan de repræsenteres af proteiner fra den ydre membran. Det inkluderer for eksempel også enzymet hyaluronidase, som ødelægger bindevæv.

9. Hvilke enzymer til "forsvar og aggression" af bakterier kender du? Metoder til deres påvisning i bakterier.

Enzymer af "forsvar og aggression" fremmer spredning af bakterier i kroppens væv. Disse inkluderer plasmacoagulase, fibrinolytisk enzym, lecithinase, hyaluronidase, DNase osv..

For at detektere hyaluronidase injiceres en kanin intradermalt med 0,2 ml mascara i saltvand i et område af den hårede hud, og 0,2 ml slagtekrop med tilsætning af filtratet af staphylococcus-bouillonkultur tilsættes til det tilstødende område. Pletten ved injektionsstedet for mascara med filtrat efter 24-48 timer er flere gange større end stedet på injektionsstedet for mascara uden filtrat på grund af øget vævspermeabilitet i nærværelse af hyaluronidase.

For at detektere det fibrinolytiske enzym inokuleres testkulturen i petriskåle med agarmedium indeholdende plasma. Efter inkubation i 24-48 timer ved 37 grader dannes en clearingzone omkring bakteriernes kolonier, der producerer fibrinolysin.

For at detektere plasmacoagulase inokuleres testkulturen i 0,2 ml citreret kanin eller humant plasma. I tilfælde af plasmakoagulaseproduktion 2-4-6-18 timer efter inkubation ved 37 grader opstår plasmakoagulering. Under kontrol forbliver plasma flydende.

For at identificere lecithinase podes kulturen under undersøgelse på æggeblomme. i nærværelse af lecithinase dannes en zone med uklarhed og en regnbue-kronblade omkring bakteriekolonierne.

Allergisk metode til diagnose af infektiøse sygdomme

Allergiske tests - biologiske reaktioner til diagnose af en række sygdomme baseret på kroppens øgede følsomhed forårsaget af et allergen.

I mange smitsomme sygdomme udvikler en øget følsomhed i kroppen for patogener og deres metaboliske produkter på grund af aktivering af cellulær immunitet. Allergiske tests, der anvendes til diagnosticering af bakterielle, virale, protozoale infektioner, mykoser og helminthiasis er baseret på dette. Allergiske tests har specificitet, men de er ofte positive hos dem, der har været syge og vaccineret.

Alle allergiske tests er opdelt i to grupper - in vivo og in vitro test.

Allergiske tests in vitro er baseret på påvisning af sensibilisering uden for patientens krop. De bruges, når der af en eller anden grund ikke kan udføres hudtest eller i tilfælde, hvor hudreaktioner giver uklare resultater..

For at udføre allergiske tests anvendes allergener - diagnostiske lægemidler designet til at detektere specifik sensibilisering af kroppen. Infektiøse allergener, der anvendes til diagnosticering af infektiøse sygdomme, er oprensede filtrater af bouillonkulturer, sjældnere suspensioner af dræbte mikroorganismer eller AG'er isoleret fra dem.

Hudtest.Infektiøse allergener injiceres som regel intradermalt eller kutant ved at gnide ind i arificerede hudområder. Med den intradermale metode injiceres 0,1 ml af allergenet i den midterste tredjedel af underarmens forreste overflade med en speciel tynd nål. Efter 28 - 48 timer vurderes resultaterne af HRT-reaktionen, idet størrelsen af ​​paplen bestemmes ved injektionsstedet.

Ikke-infektiøse allergener (plantepollen, husstøv, fødevarer, medicin og kemiske præparater) injiceres i huden med en injektion (prikprøve), kutan ved ardannelse og gnidning eller ved intradermal injektion af en fortyndet allergenopløsning. IHN bruges som en negativ kontrol, og en histaminopløsning bruges som en positiv kontrol. Resultaterne tages i betragtning inden for 20 minutter (GNT) i henhold til størrelsen på paplerne (undertiden op til 20 mm i diameter), tilstedeværelsen af ​​ødem og kløe. Intradermale tests udføres i tilfælde af et negativt eller tvivlsomt prik-testresultat. Sammenlignet med sidstnævnte reduceres allergendosen 100-5000 gange.

Hudtest for tilstedeværelse af HRT anvendes i vid udstrækning til at detektere infektion hos mennesker med mycobacterium tuberculosis (Mantoux-test), forårsagende midler til brucellose (Burne-test), spedalskhed (Mitsudas reaktion), tularæmi, kirtler, actinomycosis, dermatomycosis, toxoplasmose, nogle helminthiaser osv.

In vitro prøver. Disse forskningsmetoder er sikre for patienten, ret følsomme og gør det muligt at kvantificere niveauet af allergi i kroppen..

I øjeblikket er der udviklet tests til bestemmelse af sensibilisering baseret på reaktionerne af T- og B-lymfocytter, vævsbasofiler, påvisning af generelt specifikt IgE i blodserum osv. Disse inkluderer inhibering af leukocytmigration og eksplosionstransformation af lymfocytter, specifik rosetdannelse, Shelleys basofile test, degranuleringsreaktion af vævsbasofiler samt allergosorbentmetoder (bestemmelse af specifikt IgE i blodserum).

Reaktionshæmning af leukocytmigration (RTML). TML er baseret på undertrykkelse af migrationen af ​​monocytter og andre leukocytter under påvirkning af mediatorer produceret af sensibiliserede lymfocytter i nærvær af et specifikt allergen.

Lymphocyte blast transformation (RBT) reaktion Denne reaktion er baseret på evnen hos normale perifere blodlymfocytter til at indgå i mitose og blive til eksplosionsformer under deres dyrkning in vitro under indflydelse af specifikke faktorer - allergener og uspecifikke stimulatorer af mitogenese - mitogener (phytohemagglutinin, concanavalin A og lipopolyscharider andre stoffer).

Reaktion af specifik rosetdannelse Rosetter er karakteristiske formationer, der opstår in vitro som et resultat af adhæsion af erytrocytter til overfladen af ​​immunkompetente celler. Rosettering kan forekomme spontant, da humane T-lymfocytter indeholder receptorer til fårerytrocytter. Spontan rosetdannelse hos raske mennesker er 52 - 53% og fungerer som en indikator for den funktionelle tilstand af T-lymfocytter. Dette fænomen gengives også, hvis der anvendes erythrocytter, hvorpå de tilsvarende allergener er fastgjort..

Reaktionen af ​​degranulering af vævsbasofiler Metoden er baseret på det faktum, at under virkningen af ​​et allergen degranulerer vævsbasofiler af en rotte, der tidligere er sensibiliseret med cytofil AT fra patientens blodserum..

Shelleys basofile test. Det er kendt, at humane eller kaninbasofile granulocytter også nedbrydes i nærværelse af patientens serum og det allergen, som patienten er følsom over for.

In vitro bestemmelse af IgE-antistoffer. Laboratoriediagnostik af sygdomme baseret på GNT er baseret på bestemmelse af allergenspecifikt IgEanti-IgE. Når man bruger et radioaktivt mærke, kaldes metoden radioallergosorbent test (PACT), men oftere bruges et enzym eller fluorescerende stof (FAST) som et mærke. Analysetid - 6-7 timer. Princippet for metoden: et kendt allergen, der er fikseret på fast basis, inkuberes med patientens blodserum; serumspecifik IgE-anti-IgE binder til allergenet og forbliver således fast på substratet og kan interagere specifikt med det tilsatte mærkede anti-IgE.

MedGlav.com

Medicinsk oversigt over sygdomme

Diagnosticering af allergiske sygdomme. Anamnese, prøver, test, immunologiske undersøgelser af allergi.

PRINCIPPER FOR DIAGNOSTISK ALLERGI.


Opgaverne med at diagnosticere en allergisk sygdom er:

  • Fastlæggelse af sygdommens art (allergisk eller ikke-allergisk). Ofte kan dette fastslås på baggrund af patientens karakteristiske klager og det kliniske billede af sygdommen (for eksempel med høfeber, serumsygdom). Imidlertid opstår der undertiden betydelige vanskeligheder (for eksempel med usædvanlige reaktioner på at tage medicin, mad osv.);
  • Det er nødvendigt at differentiere, om en given allergisk sygdom virkelig er allergisk eller pseudo-allergisk, det vil sige det er nødvendigt at bestemme graden af ​​deltagelse af immun- og ikke-immunmekanismer i udviklingen af ​​denne sygdom;
  • Det er vigtigt at finde ud af årsagen til sygdommen. Kendskab til årsagen sammen med etableringen af ​​den virkelige allergiske karakter af processen giver anledning til et yderligere passende behandlingsforløb, udnævnelse af specifik hyposensibilisering.

Undersøgelsesmetodernes særegenheder er den udbredte anvendelse af specifikke diagnostiske tests in vivo og laboratorium.


ALLERGOLOGISK ANAMNESE.


Under ledelse af akademiker fra akademiet for medicinske videnskaber i Sovjetunionen AD Ado blev der udviklet et diagram over sagshistorien, hvor spørgsmålene om den allergologiske historie blev formuleret i detaljer. Historiens hovedopgaver:

  • At fastslå, om der er en arvelig disposition for allergiske sygdomme;
  • Identificere forholdet mellem miljøfaktorer og sygdommens udvikling
  • Identificer de grupper af allergener eller enkeltallergener, der kan forårsage allergi.

Under afhøringen finder de ud af, hvilke allergiske sygdomme der tidligere var eller i øjeblikket er i patientens familie, hvordan patienten reagerer på introduktionen af ​​serum, vacciner og medicin; er sygdommens sæsonbestemthed bemærket, dens forbindelse med forkølelse; hvor og hvornår forværringer opstår, hvad er leve- og arbejdsvilkårene.

For eksempel er patienter, der er allergiske over for husstøv, kendetegnet ved "eliminationseffekten" - en forbedring af tilstanden, når de forlader hjemmet.
Hvis du er allergisk over for nogle industrielle allergener, er mandagseffekten karakteristisk - en forværring på arbejdspladsen efter weekenden. Forbindelsen med forkølelse opdages normalt hos patienter med en infektiøs-allergisk form for bronkialastma, rhinitis. For patienter med høfeber er en udtalt sæsonbetinget sygdom karakteristisk - dens forværring under blomstringen af ​​planter, hvis pollen er et allergen. Arvelig disposition påvises hos patienter med reaginisk type allergiske reaktioner.

Således forhører patienten allerede en til at bestemme mulige allergener og foreslå typen af ​​allergisk reaktion. Disse antagelser skal bekræftes ved hjælp af specifikke undersøgelsesmetoder - hud, provokerende og andre test..

HUDTEST TIL ALLERGIER.

Et allergen injiceres gennem huden for at detektere specifik sensibilisering af kroppen og vurdere størrelsen og arten af ​​det resulterende ødem eller den inflammatoriske reaktion. Hudtest (CP) udføres normalt i remission..

Skel mellem: kvalitative og kvantitative, direkte og passive hudtest.

  • Kvalitative tests svarer på spørgsmålet: er der sensibilisering over for dette allergen eller ej? En positiv test betragtes endnu ikke som bevis for, at allergenet er årsagen til sygdommen. Årsagen kan være et andet allergen, som CP ikke blev sat i. Sensibilisering over for et allergen resulterer ikke altid i udviklingen af ​​en allergisk reaktion. Derfor er det muligt for mennesker, der er næsten sunde, at afsløre eksistensen af ​​sensibilisering over for visse allergener (husstøv, streptokokker osv.) Uden tegn på at udvikle en allergisk reaktion.
    Et allergen kan betragtes som årsagen til sygdommen, hvis de positive resultater af prøven falder sammen med historikdataene. I mangel af en sådan sammenfald eller utilstrækkelig ekspression af CP udføres provokerende tests.
  • Kvantitative tests giver en idé om graden af ​​sensibilisering. De er indstillet til at identificere individuel følsomhed og løse problemet med indledende doser af allergenet under specifik hyposensibilisering..
  • Med Direct KP administreres allergenet til patienten under undersøgelse. Ved passiv eller indirekte CP injiceres patientens blodserum intradermalt i en sund person, og derefter injiceres et allergen i seruminjektionsstederne (Prausnitz-Küstner-reaktion).

Tidspunktet for forekomst af en hudreaktion efter udsættelse for et allergen og dens natur afhænger af typen af ​​allergisk reaktion. Hvornår reaginic type (Type I) reaktionen vises i de første 10-20 minutter. Det er en rund eller uregelmæssig blister med pseudopodia. Blærens farve er lyserød eller bleg med et område med arteriel hyperæmi omkring. Denne reaktion kaldes blærer, urticarial eller øjeblikkelig type.
Til allergiske processer immunkomplekse og forsinkede typer (III og IV typer) hudreaktion er en akut betændelse med alle dens tegn - rødme, hævelse, feber i området med betændelse og ømhed. Forskellen mellem typerne III og IV ligger i udviklingstidspunktet og intensiteten af ​​betændelse. I type III er betændelse mere udtalt, den vises efter 4-6 timer og forsvinder efter 12-24 timer. I type IV når inflammation sin maksimale udvikling inden for 24-48 timer. Det er således muligt at bestemme typen af ​​allergisk reaktion på dette allergen ved hjælp af CP.

Typer af hudtest (CP).

Anvendelse CP (syn: kutan, epikutan, patch test).
Det bruges til allergiske hudsygdomme på områder af huden, der ikke er påvirket af skader. Allergener er oftest forskellige kemikalier, herunder stoffer. De bruges i ren form eller i opløsninger i koncentrationer, der ikke forårsager hudirritation hos raske mennesker. Teknikken til opsætning af kontrol varierer. Normalt fugtes et stykke gasbind ca. 1 cm 2 med en opløsning af allergenet og påføres huden på underarmen, underlivet eller ryggen. Dæk derefter med cellofan og fastgør med klæbende gips. Resultaterne evalueres efter 20 minutter, 5-6 timer og 1-2 dage.

Afskærmningskontrolpunkter.
Med denne type CP påføres forskellige allergener på underarmenes hud i form af dråber i en afstand på 2-2,5 cm og gennem hver dråbe med en scarifier eller nålespids til hvert allergen udføres skader på epidermis for ikke at beskadige blodkarrene. En variant af denne type CP er en injektionstest (stikprøve) - kun epidermis er gennemboret med en injektionsnål. Scarification CP bruges i tilfælde, hvor der er mistanke om tilstedeværelse af en reaginisk type allergisk reaktion (med pollinose, atopisk form af bronchial astma eller rhinitis, Quinckes ødem, urticaria). De afslører kun den reaginiske type allergi. De vurderes efter 15-20 minutter..

Intradermale tests.
Med denne type CP injiceres allergenet intradermalt. Disse tests er mere følsomme end scarification, men også mindre specifikke. Ved iscenesættelse er komplikationer mulige i form af organ og generelle allergiske reaktioner. De bruges til at detektere sensibilisering over for allergener af bakteriel og svampeoprindelse samt til at bestemme graden af ​​følsomhed over for allergener af ikke-infektiøs karakter. Hymenoptera allergener giver ofte ikke positive arificeringstest, så de injiceres også intradermalt, og reaktionen påvises i form af systemiske manifestationer. En test med disse allergener kan klassificeres som provokerende tests..

Prausnitz-Küstner-reaktion - passiv hudfølsomhedsreaktion.
Det blev brugt til at diagnosticere reagin-typen af ​​allergiske reaktioner, for eksempel med lægemiddel, fødevareallergi osv., Samt til at studere reagensernes egenskaber og bestemme deres titer. Princippet for reaktionen er den intradermale administration af blodserum fra patienten til en sund modtager og den efterfølgende introduktion af de undersøgte allergener til disse steder. I nærvær af passende antistoffer i blodserumet udvikler modtageren en øjeblikkelig hudreaktion på injektionsstederne. I øjeblikket anvendes denne reaktion sjældent på grund af faren for at overføre latent infektion med blodserum (hepatitisvirus osv.) Samt fremkomsten af ​​laboratoriemetoder til bestemmelse af reagenser.

Intensiteten af ​​CP vurderes enten ved hjælp af plusser (fra 0 til fire plusser) eller af papulens diameter eller inflammatorisk fokus. I betragtning af muligheden for at udvikle alvorlige komplikationer op til anafylaktisk chok i tilfælde af manglende overholdelse af teknikken til indstilling af CP såvel som kompleksiteten i fortolkningen af ​​de opnåede resultater, kan CP kun udføres i allergirum af specialuddannet personale under opsyn af en allergiker.

TILSKUDNINGSTESTER TIL ALLERGIER.


Provokative tests (PT) er en metode til etiologisk diagnose af allergiske reaktioner, der er baseret på reproduktion af denne reaktion ved at indføre et allergen i stødorganet. Efter typen af ​​chokorgan (dvs. det organ, hvis læsion fører i billedet af sygdommen), skelnes mellem følgende typer PT.

Konjunktiv PT bruges til at identificere allergener, der forårsager udvikling af allergisk konjunktivitis eller polliose, som opstår med konjunktivitis symptomer. Udfør med forsigtighed af frygt for at forårsage en skarp inflammatorisk reaktion. Allergenet indskydes i den nedre bindehinde i en koncentration, der giver en svagt positiv CP. Med en positiv reaktion opstår lakrimation, konjunktival hyperæmi, kløe i øjenlågene.

Nasal PT bruges til allergisk rhinitis. Mest sikkert. Allergen i samme dosis som for konjunktival PT indgives i den ene halvdel af næsen. Med en positiv reaktion vises nysen, kløe i næsen, rhinoré, vejrtrækningsbesvær gennem denne halvdel af næsen. Hævelse af skelens slimhinde, indsnævring af næsepassagen bestemmes ved næsehornskopisk undersøgelse.

Inhaleret PT bruges normalt til bronkialastma. Undersøgelsen udføres i remissionsfasen på et hospital. Sidstnævnte skyldes, at et alvorligt astmaanfald kan udvikle sig straks eller senere (efter 4-24 timer), derfor skal patienten overvåges. Før du indstiller PT, registreres karakteren af ​​den tvungne VC (FVC) -kurve på spirografen, og dens værdi beregnes i det første sekund - FVC; også beregne Tiffneau-koefficienten, som er forholdet mellem FVC; til VC i procent. Hos raske mennesker er det 70-80%. Derefter inhalerer individet først kontrolopløsningen gennem inhalatoren, og hvis der ikke er nogen reaktion på den, allergenopløsningerne sekventielt startende fra den mindste koncentration til den, der giver en mærkbar reaktion. Spirogrammer optages hver gang. Testen betragtes som positiv, når FVC falder! og Tiffneau-forholdet med mere end 20%. Den udviklede bronkospasme stoppes af bronkodilatatorer. Med samtidig bestemmelse af den maksimale volumetriske udåndingsstrømningshastighed ved forskellige dele af udåndingskurven er det muligt at drage en konklusion om placeringen af ​​forhindringen (små eller større luftveje). Kapitel 19 beskriver PT for eksogen allergisk alveolitis.

Kold PT bruges til kold urticaria. Et stykke is eller en isflaske placeres på underarmen i 3 minutter. Hvis testen er positiv, udvikler en blærende hudreaktion 5-6 minutter efter ophør af kulden, normalt svarende til formen på et is eller en flaske.

Termisk PT bruges til termisk urticaria. En vejeflaske med varmt vand (40-42 ° C) anbringes på underarmen i 10 minutter. En positiv reaktion er kendetegnet ved dannelsen af ​​en blister.

Leukocytopenisk PT bruges til etiologisk diagnose af mad og undertiden lægemiddelallergier. For det første bestemmes antallet af leukocytter i det perifere blod hos en patient med fødevareallergi på baggrund af en eliminationsdiæt og under hvile på tom mave to gange inden for en time. Derefter, hvis forskellen mellem de to undersøgelser ikke overstiger 0,3 x 10 u / l, skal du tage mad eller medicin, der skal tages. Efter 30, 60 og 90 minutter tælles antallet af leukocytter. Testen betragtes som positiv, når faldet i leukocytter er mere end 1 x 10 u / l. I tilfælde af lægemiddelallergi skal man være forsigtig med ikke at teste, om der er anafylaktiske reaktioner i anamnesen. En negativ test udelukker ikke sensibilisering over for det testede allergen.

Trombocytopen PT bruges også til etiologisk diagnose af mad og undertiden lægemiddelallergier. Udfør på samme måde som leukocytopenisk PT. Anses positivt, når antallet af blodplader reduceres med 25% eller mere.

Eksponerings-PT'er anvendes som vejledende test. Forskeren, der ikke har klare tegn på sygdommen, placeres i forhold, hvor mistænkte allergener kan være for eksempel på et apotek, i et værksted, i en stald, i en mølle, på steder med blomstrende planter osv. I nærvær af passende allergener i miljøet udvikler en forværring af sygdommen sig.

Ved hjælp af provokerende tests opdages atopiske og immunkomplekse typer allergiske reaktioner godt, det er sværere at opdage en allergisk reaktion af en forsinket type.


Laboratoriestudier i allergier.


Forskellige immunologiske forskningsmetoder er af stor betydning for identifikation af eksisterende sensibilisering. Fordelen ved disse metoder er deres fulde sikkerhed for patienter..
Alle immunologiske metoder afslører kun sensibiliseringstilstanden, det vil sige, de indikerer, at denne person allerede har haft kontakt med dette antigen (allergen). De kan ikke tjene som en indikator eller bevis for, at det er over for dette antigen (allergen), at en allergisk reaktion vil udvikle sig, for der er behov for et antal yderligere tilstande for at implementere en allergisk reaktion ud over sensibilisering..

Da der er fire typer sensibilisering, bør flere metoder anvendes til diagnostiske formål til at vurdere den mulige involvering af alle fire typer sensibilisering..

At identificere Reagin-type (Type I) sensibilisering, følgende reaktioner kan anvendes:

  • radioallergosorbent test (RAST), der bestemmer IgE-antistoffer mod forskellige typer allergener;
  • radioimmunosorbent test (RIST), som gør det muligt at bestemme koncentrationen af ​​total IgE. I betragtning af at sygdomme af den reaginiske type ledsages af en stigning i total IgE, vil en øget koncentration af dette Ig være en faktor, der delvis bekræfter deltagelsen af ​​den reaginiske mekanisme, og i fravær af en sygdom vil den tjene som en risikofaktor for dens udvikling;
  • Schultz-Dale-reaktionen er direkte og passiv. Den direkte reaktion bruges normalt i eksperimenter. For at gøre dette fjernes et glat muskelorgan fra et sensibiliseret dyr, placeres i et bad, og dets sammentrækninger registreres. Derefter tilsættes et allergen til badet, og intensiteten af ​​glat muskelspasmer vurderes. En passiv reaktion kan anvendes til at detektere reagenser i syge mennesker. For at gøre dette placeres et stykke af abens ileum i badet, og derefter tilsættes patientens serum.
    Antistoffer er fikseret i tarmen. Efterfølgende tilsætning af allergenet i nærvær af de tilsvarende antistoffer forårsager tarmkontraktion.
  • basofile tests - direkte og passive;
  • test for specifik frigivelse af histamin;
  • mast celle degranulering test.

Cytotoksisk type (II type) med sensibilisering kan identificeres ved hjælp af:

  • forskellige varianter af metoden til immunfluorescens;
  • Coombs 'test for autoimmun hæmolytisk anæmi;
  • radioimmunologisk forskningsmetode;
  • Steffen-reaktion.
  • forskellige metoder til bestemmelse af cirkulerende immunkomplekser i biopsimateriale af komplekser deponeret i væv og analyse af deres sammensætning;
  • bestemmelse af reumatoid faktor;
  • forskellige metoder til påvisning af præcipiterende antistoffer.
  • metoder til bestemmelse af lymfokiner dannet efter kontakt med et allergen. De mest almindelige reaktioner af denne type er reaktioner med inhibering af makrofagmigration og dannelse af lymfotoksin.


Immunoblotting metode.

I øjeblikket er den mest anvendte metode til immunoblotting.
Immunoblotting (immunoblot) er en meget specifik og meget følsom referencemetode til påvisning af antistoffer mod individuelle antigener (allergener). Immunoblot er en meget informativ og pålidelig metode. Denne forskningsmetode har ingen kontraindikationer..


Allergidiagnostik Immuno CAP.

I de senere år er der introduceret nye teknologier til mere nøjagtig testdiagnostik af allergier --- Allergidiagnostik Immuno CAP.
Hedder "Allergochip Immuno CAP".

Til ImmunoCAP-testene anvendes kunstige rekombinante allergener opnået ved molekylær kloning. Med deres hjælp opnås et resultat af en sådan nøjagtighed, der ikke kan opnås med den traditionelle metode - ikke kun hovedbestanddele, der er specifikke for et givet allergen, bestemmes, men også mindre. "Allergochip" tillader ikke kun nøjagtigt at finde ud af det vigtigste allergen, men også stoffer, der kan forårsage krydsallergi.

Denne metode giver dig mulighed for at bestemme både milde former for en allergisk reaktion (dermatitis) og mere farlig (astma).
Bestemmelse af IgE-koncentrationen tillader ikke kun diagnosticering af denne allergiske reaktion, men også forudsigelse af den yderligere mulige udvikling af allergier.
En anden vigtig fordel ved ImmunoCAP-analyser er eksekveringshastigheden - fire dage. Men for nu er denne tilgængelig. ikke for alle laboratorier.

1. Metoder til mikrobiologisk diagnose af infektiøse sygdomme: bakteriologisk, bakteriologisk, biolog, serol, allergi og selve immunsystemet. Deres fordele og ulemper.

Bakterioskopisk (mikroskopisk) metode - et sæt metoder til at detektere og studere de morfologiske og tinktoriske egenskaber hos bakterier (mikrober) i laboratoriekultur, patologisk materiale eller prøver fra det eksterne miljø ved hjælp af mikroskopi. De bruges til at etablere diagnosen af ​​en infektiøs sygdom eller anden proces forårsaget af mikrober samt til at identificere en isoleret ren kultur. Metoden til bakterioskopisk undersøgelse er særlig vigtig, hvis mikroben har morfologiske og tinktoriske træk eller speciel lokalisering i kroppens væv og celler. Kun i nogle infektioner er en morfologisk undersøgelse tilstrækkelig til en diagnose.

Til diagnose af de fleste infektioner har mikroskopi, som den første fase af mikrobiologisk forskning, kun en hjælpestørrelse, omtrentlig værdi..

Værdien af ​​den bakterioskopiske metode ligger i dens enkelhed, tilgængelighed af teknikker og hastigheden for at opnå resultater (30-60 minutter eller mindre). Imidlertid er dens specificitet på grund af ligheden mellem morfologien for forskellige arter lille, og følsomheden er begrænset - opløsningens metode er i gennemsnit 100.000 celler pr. Ml.

Mikroskopiske metoder består i fremstilling af mikroskopiske præparater til mikroskopi (native eller farvede ved enkle og komplekse metoder) ud fra det undersøgte materiale og deres mikroskopi ved hjælp af forskellige typer mikroskopiske teknikker (lys, mørk felt, fasekontrast, selvlysende, elektronisk). I de fleste tilfælde er resultaterne af mikroskopiske undersøgelser vejledende. Ikke desto mindre kan mikroskopi af materialet bestemme nogle morfologiske tegn på patogener (tilstedeværelsen af ​​kerner, flageller, intracellulære indeslutninger osv.) Samt fastslå tilstedeværelsen eller fraværet af mikroorganismer i de sendte prøver.

BAKTERIOLOGISKE METODER

Klassisk bakteriologisk (virologisk, mykologisk) forskning (kaldet "guldstandarden" for mikrobiologisk diagnose). Dens formål er at isolere og identificere patogenet.

Den bakteriologiske (virologiske, mykologiske) forskningsalgoritme består af følgende hovedfaser:

1) primær mikroskopi (valgfri)

2) primær såning for at isolere ren kultur;

3) akkumulering af ren kultur;

4) undersøgelse af komplekset af biologiske egenskaber ved den isolerede kultur og dens identifikation. Identifikationen af ​​rene kulturer (op til typen af ​​mikroorganisme) udføres under hensyntagen til de morfologiske, tinktoriske, kulturelle, biokemiske, toksigene og antigene egenskaber ved mikroorganismen. De fleste undersøgelser involverer bestemmelse af antimikrobiel følsomhed i et isoleret patogen. Til en epidemiologisk vurdering af en mikroorganismes rolle udføres intraspecifik identifikation ved at bestemme fagovarer, biovars, resistenter osv..

Klassisk mikrobiologisk forskning har flere ulemper. Først og fremmest er dette en ret langvarig proces. Dens minimumsperiode er 3-4 dage, men der kan gå mange dage og endda uger, før det isolerede patogen identificeres nøjagtigt. For nogle patogene bakterier (Vibrio cholerae, difteribakterier) er der udviklet accelererede metoder til isolering og identifikation, men de tillader også at få et svar tidligst 36-48 timer.

Opgaven med mikrobiologisk forskning er at isolere mikroorganismer fra det undersøgte materiale og identificere, det vil sige bestemme deres art.

Grundlaget for mikrobiologisk forskning er en bakteriologisk diagnostisk metode, hvis essens er isolering af mikroorganismer i en ren kultur og deres identifikation.

For at identificere mikroorganismer undersøges følgende egenskaber:

5. Patogen: patogene enzymer - lecithinase, plasmacoagulase osv. toksigenicitet - evnen til at producere eksotoksiner (difteri bacillus, Staphylococcus aureus) (spørgsmålet blev diskuteret detaljeret i det foregående semester, se emnet "Infektion. Patogenicitet og virulens

6. Antigen (serologisk) (spørgsmålet blev diskuteret detaljeret i emnerne i afsnittet "Immunitet", se foregående semester)

7. Fagoliserbarhed - evnen til at lysere af bakteriofager (bakterievirus): følsomhed over for terapeutiske fager (til behandling af en infektiøs sygdom) og følsomhed over for diagnostiske fager (i ny, typisk); fagtypning - bestemmelse af følsomhed over for typiske fager udføres for at bestemme kilden og stierne for spredning af mikroorganismer i miljøet eller blandt kollektiverne (spørgsmålet blev diskuteret detaljeret i emnet "Bakteriofagi", se det tilsvarende emne)

8. Baktericinsensitivitet og bakteriocinogenese: udført for at bestemme kilden og stierne for spredning af mikroorganismer i miljøet eller blandt kollektivet (se emnet "Genetik af bakterier")

9. Følsomhed over for antimikrobielle lægemidler: antibiotika, kemoterapeutiske lægemidler og antiseptiske midler (til behandling af en infektiøs sygdom, emnet "Antibiotika"), desinfektionsmidler (for valg af desinfektionsmåde, se emnet "Asepsis, antiseptika. Desinfektion, sterilisering").

Den største ulempe ved den bakteriologiske metode er undersøgelsens varighed - fra 3 til 5 dage og i nogle tilfælde endnu mere.

Resultaterne af mange diagnostiske undersøgelser til påvisning af patogener afhænger stort set af deres type såvel som af tidspunktet og metoden til at tage patologisk materiale. Materialets art bestemmes af sygdommens kliniske træk: disse skal være substrater eller biologiske væsker, hvor tilstedeværelsen af ​​patogener mest sandsynligt er på dette stadium af sygdommen. Succesen med den bakteriologiske metode afhænger i høj grad af det indledende stadium, herunder opsamling af testmaterialet og dets transport, registrering af en henvisning til det bakteriologiske laboratorium..

BIOLOGISKE METODER

Biologiske metoder har til formål at bestemme tilstedeværelsen af ​​patogentoksiner i testmaterialet og påvise patogenet (især hvis det oprindelige indhold i testprøven er lavt, eller når patogenet ikke kan detekteres ved podningsmetoden, for eksempel med viral og rickettsial sygdom).

Dyr inficeres for at isolere en ren kultur af patogenet i tilfælde, hvor det ikke kan opnås ved andre metoder (for eksempel når objekterne, der undersøges, er forurenet med fremmed mikroflora, der undertrykker patogenens vækst; med et ubetydeligt indhold af mikroorganismer eller deres overgang til filtrerbare former).

Metoderne inkluderer infektion af følsomme forsøgsdyr (følsomme over for det formodede patogen) med testmaterialet efterfulgt af isolering af en ren kultur af patogenet eller ved at etablere tilstedeværelsen af ​​et mikrobielt toksin og dets natur eller gengive et karakteristisk klinisk billede..

Modellering af eksperimentelle infektioner hos følsomme dyr er et vigtigt redskab til at studere sygdommens patogenese og arten af ​​interaktioner i mikroorganismen - makroorganismesystemet. Til biologiske forsøg anvendes kun sunde dyr med en bestemt kropsvægt og alder..

Det infektiøse materiale injiceres oralt, i luftvejene, intraperitonealt, intravenøst, intramuskulært, intradermalt og subkutant, i det forreste kammer i øjet gennem kranialåbningen, suboccipital (i den store cistern i hjernen). Blod tages fra dyr in vivo, udsondring fra bukhinden, efter døden, blod, stykker af forskellige organer, CSF, udsondring fra forskellige hulrum.

Ulemper: a) behovet for at vedligeholde et vivarium; b) undersøgelsens varighed. Derudover er det langt fra altid muligt at isolere patogenet, selv med laboratorieinfektion, hvilket er særligt karakteristisk for virusinfektioner..

Den SEROLOGISKE metode består i at bestemme titeren på specifikke antistoffer i patientens serum. Til implementeringen anvendes forskellige immunreaktioner, både enkle (agglutination og dens sorter) og komplekse (RSK, ELISA osv.).

Klassisk serodiagnose er baseret på:

1). Bestemmelse af antistoffer mod patogenet i den diagnostiske titer;

2) Detektion af antistoffer mod det forårsagende middel til en række infektiøse sygdomme i blodserumet, der undersøges, er ikke nok til at stille en diagnose, da det kan afspejle tilstedeværelsen af ​​immunitet efter infektion eller efter vaccination. Det er grunden til, at patientens parrede sera undersøges, taget i de første dage af sygdommen og efter 7-10 dage (nogle gange kan dette interval være længere). I dette tilfælde vurderes stigningen i antistoftiter. En stigning i antistoftiter med 4 gange eller mere indikerer den infektiøse natur af antistoffer.

3) I eksotiske infektiøse sygdomme såvel som i hepatitis, HIV-infektion og nogle andre sygdomme indikerer selve bestemmelsen af ​​antistoffer, at patienten er inficeret og har diagnostisk værdi.

Serologisk diagnostisk metode bruges fra slutningen af ​​den første til begyndelsen af ​​den anden uge af sygdommen.

For at detektere antistoffer tilsættes et kendt antigen til testserumet. Disse lægemidler, kaldet diagnosticums, er en suspension af dræbte mikroorganismer (deres individuelle antigener) eller erythrocytter (latexpartikler), hvorpå mikroorganismer eller deres antigener adsorberes..

RIGTIG IMMUN DIAGNOSTISK METODE

Selvimmun metode (ekspres)

Formål: søgning efter antigener fra mikrober i patologisk materiale ved hjælp af serologiske immunresponser (se reaktioner i tillæg 6 i afsnit 4).

Serologiske reaktioner af immunitet mellem antigener (AG) og antistoffer (AT) kaldes. Determinanten af ​​hypertension binder til det aktive centrum af AT. Forbindelsen af ​​AG og AT udføres gennem hydrogen og hydrofobe bindinger, interaktion mellem ioner, Coulomb og van der Waltz kræfter. Styrken af ​​forbindelsen mellem AG og AT tilvejebringes ikke kun af de bindende kræfter, men også af den optimale tilpasning af det AT-aktive sted til AG-determinanten. Serologiske reaktioner finder sted i to faser. Den første - specifikke usynlige - er interaktionen mellem AG og AT. Den anden fase - synlig - vises afhængigt af reaktionstypen, der bestemmes af egenskaberne af AG, AT og andre reaktionsingredienser. Der er flere typer reaktioner: agglutination, udfældning (immundiffusion), lysis, neutralisering osv..

Agglutinationsreaktion

I agglutinationsreaktionen (RA) er antigenet involveret i form af en korpuskulær partikel. Disse kan være suspensioner af mikroorganismer, kropsceller, for eksempel erythrocytter.

Når de blandes med et specifikt antiserum, skelnes der visuelt flager - immunkomplekser hænger sammen og sætter sig..

Agglutinationsreaktionen kan indstilles kvalitativt - på glas og kvantitativt - i reagensglas, hvor serumfortyndinger fremstilles.

Indirekte (passiv) hæmagglutinationsreaktion (RNGA) er en slags RA-modifikation.

Dets essens ligger i det faktum, at antigenmolekyler adsorberes på overfladen af ​​erytrocytter (efter behandling af erytrocytter med tannin eller formalin). Sådanne "fyldte" med AG-erythrocytter erhverver evnen til at agglutinere med immunserum, der er specifikt for denne AG.

Dannelsen af ​​AG-AT-komplekset medfører også limning af erythrocytter (hæmagglutinatformer i bunden af ​​brønden eller reagensglas i form af en "omvendt paraply"), som er let at tage i betragtning. Således er erythrocytter ikke direkte involveret i dannelsen af ​​AG-AT-komplekset, men tjener som dets indikatorer.

RNGA er mere følsom end RA.

Coombs reaktion

Dette er en test til påvisning af ufuldstændige antistoffer, der ikke selv kan agglutinere antigener, men som er i stand til at binde sig til dem. Reaktionen udføres i trin: erythrocyte diagnosticum tilsættes til blodserumet hos patienten - kendte antigener adsorberet på erythrocytter. Efter inkubation vaskes erytrocytterne, og der tilsættes kanin-anti-humant globulin AT. Som et resultat klæber antiglobulinserum sammen erytrocytter gennem AG-AT-komplekserne dannet på dem.

Der er to typer Coombs-reaktioner: direkte og indirekte:

• Direkte metode: påvisning af anti-rhesus antistoffer adsorberet på erytrocytterne hos den nyfødte.

Blod tages fra en nyfødt, erytrocytter vaskes og tilsættes til dem

antiglobulin-antistoffer: fænomenet "gitter" realiseres - agglutination af erytrocytter synlige for øjet forekommer

• Indirekte metode: påvisning af anti-rhesus antistoffer i moderens serum.

/// 1. Standard Rh-positive erytrocytter tilsættes til reagensglas med moderens serum. Anti-rhesus antistoffer fra moderens serum adsorberes på erythrocytter.

2. Indfør antiglobulinserum (antiglobulinantistoffer) i reagensglasset: fænomenet "gitter" realiseres - agglutination af erytrocytter, der er synlige for øjet, forekommer

Nedbør reaktion

Et fint dispergeret (opløseligt antigen) er involveret i udfældningsreaktionen (RP). Ved kontakt med antistoffer - præcipitiner dannes et bundfald.

Udfældningsreaktionen kan udføres i et flydende medium (i smalle rør) og i en gel (i petriskåle). Når RP anbringes i smalle reagensglas, lages en væske indeholdende et af reagenserne, for eksempel en gennemsigtig ekstrakt fra mikrobielle celler (0,2 ml), på et transparent udfældende serum (0,2 ml). I positive tilfælde dannes en grå-hvid ring ved grænsefladen mellem væskerne efter 1-5 minutter. RP, ligesom RA, går i elektrolytten, men har en højere følsomhed.

//// Skemaer for nedbørsreaktioner i reagensglas (A) og agar (B).

En af varianterne af RP i gelen er reaktionen til bestemmelse af toksigeniciteten af ​​difteri-bacillus. For at gøre dette placeres en strimmel sterilt filterpapir gennemblødt i antitoksisk anti-difteri serum i en petriskål på et næringsmedium. Derefter podes skålen med testkulturerne i form af pletter i en afstand på 0,6-0,8 cm fra papirkanten. Opvasken inkuberes ved 37 ° C i 24 timer. I nærvær af en toksigent kultur på stedet for interaktion af toksinet med antitoksin dannes udfældningslinjer i form af buer (whiskers, halvringe).

Immunfluorescensreaktion (RIF)

Ret linje (Koons metode). Mikroorganismer behandlet med antistoffer mærket med fluorokromer er i stand til at gløde i et fluorescerende mikroskop.

Indirekte. På det første trin interagerer mikroorganismer med specifikt serum. Endvidere påvirkes det dannede immunkompleks af antiglobulinserum mærket med fluorochrom. Immunkomplekset med dette konjugat lyser i et fluorescerende mikroskop.

Komplement fiksering reaktion (CBC)

Dette er en antigenlyseringsreaktion (for eksempel cytolyse, bakteriolysis) under virkning af antistoffer med deltagelse af komplement. Hvis antigenet er en bakteriecelle eller virus, ledsages lysis ikke af synlige manifestationer. For at detektere tilstedeværelsen af ​​AG + AT + komplementskomplekset i det eksperimentelle system, hvor en af ​​komponenterne (AG eller AT) er ukendt, anvendes derfor indikatorsystemet AG + AT, hvor begge komponenter er kendte, og lysis af antigenet manifesteres godt, da erythrocytter tages som AG... Reaktionen er baseret på komplementets evne - et komplekst system af proteiner fra normalt hvirveldyrsserum - til at fiksere på AG-AT-komplekset og den efterfølgende lysering af antigenet. Der er fem komponenter involveret i RSC: AG-AT i det eksperimentelle system, hvor et af reagenserne er ukendt, komplement- og indikatorsystemet.

Indikator - hæmolytisk system består af en suspension af ram erythrocytter og kanin hæmolytisk serum opnået ved immunisering med ram erythrocytter. Hvis AG og AT i det eksperimentelle system svarer til hinanden, er resultatet af denne interaktion komplementbinding. Indikatorsystemet registrerer gratis, ubundet supplement. Hvis komplementet forbliver frit, binder det sig til komplekset af erytrocytter - hæmolytisk serum og lyserer erytrocytterne. Således betyder tilstedeværelsen af ​​hæmolyse et negativt CSC-resultat, og fraværet af hæmolyse betyder et positivt resultat..

Immunoanalysemetode

Meget følsom metode til påvisning af AG eller AT baseret på AG-AT-reaktionen ved hjælp af enzymmærket AG eller AT.

Et skematisk diagram over et enzymimmunoanalyse til påvisning af AT er som følger. Kendt AH (virus, protein) - diagnosticum - er fast på den faste fase. Serum af motivet med ukendt AT føjes til det. Efter inkubation og vask forbliver antigenspecifikke AT'er på antigenet, hvis der er nogen i serumet hos individet. For at detektere AG - AT-komplekset tilsættes et enzymmærket kaninantiglobulinserum (AGS-F) til det. For at opnå dette serum immuniseres en kanin med humane globuliner. Serumet opnået fra kaninen er mærket med et enzym, for eksempel peberrodsperoxidase. Hvis testserumet indeholder AT til AG (diagnosticum), vil de tjene som et antigen for antiglobulinserum. Efter den anden vask kan det dannede AG + AT + AGS-F-kompleks påvises ved at tilføje et substrat til enzymet og en indikator for produkterne til substratnedbrydning. En ændring i indikatorens farve indikerer tilstedeværelsen af ​​det ønskede AT i serumet hos individet.

ALLERGISK DIAGNOSTISK METODE.

Med mange smitsomme sygdomme udvikler en overfølsomhedstilstand med gentagen introduktion af patogenet eller dets metaboliske produkter. Denne tilstand, kaldet infektiøs allergi, er karakteristisk for tuberkulose, tularæmi, brucellose, kirtler, syfilis, miltbrand, toxoplasmose, fåresyge, herpes simplex og en række andre infektioner..

For at identificere en infektiøs allergi anvendes allergiske diagnostiske tests, til hvilke et passende allergen strengt injiceres intradermalt. Tilstedeværelsen af ​​hyperæmi og infiltration indikerer et positivt resultat af reaktionen, dvs. tilstedeværelsen af ​​en infektiøs allergi..

Den allergiske diagnostiske metode er baseret på en allergisk reaktion - en forsinket overfølsomhedsreaktion (HRT).

Dannelsen af ​​HRT-reaktionen er ikke baseret på det humorale, men på kroppens cellulære immunrespons på den første (sensibiliserende) kontakt med et bestemt antigen. Sensibilisering er forbundet med den overvejende proliferation af T-lymfocytter, der bærer receptorer, der er specifikke for et givet allergen. Derefter forbliver en multiplicerende klon af sensibiliserede T-lymfocytter i kroppen i lang tid, som reagerer med et specifikt allergen, når det kommer ind i kroppen igen..

Påvisning af cellulær immunrespons - forsinket overfølsomhed (HRT), skema

* Intradermal administration af Ag-bakterier

* Efter 48 - 72 timer vises der betændelse

* Mål mængden af ​​rødme og papler

• Ag Tx-frigivelseslymfokiner, TCTL-aktivering, fagocytaktivering, inflammation

DTH-reaktioner involverer: T-hjælpere (stimulerer dannelsen af ​​T-effektorer gennem IL-2) → T-effektorer (producerer lymfokiner - kemoattraktanter og tiltrækker makrofager til inflammationsfokus) → makrofager (producerer monokin-mediatorer) → mononuklear infiltrat på stedet for allergeninjektion → værdi infiltration afhænger af graden af ​​sensibilisering af kroppen og når et maksimum efter 24-48 timer

Allergiske diagnostiske tests gør det muligt at diagnosticere tuberkulose (Mantoux-test), brucellose (Burne-test), tularæmi (test med tularin), miltbrand (test med anthraxin), chancre (Ducrey-test), spedalskhed (Mitsuda-test) og sidstnævnte differentierer endda tuberkuloid (lepromin-positiv) form fra lepromatøs (lepromin-negativ).

En positiv allergisk hudtest indikerer, at indførelsen af ​​allergenet under testen gentages, det vil sige, at personen tidligere har haft kontakt med et mikrobielt middel. Her påvirker den største ulempe ved den diagnostiske værdi af hudallergiske tests, da de ikke kun kan være positive hos de inficerede, men også hos dem, der er vaccineret mod disse sygdomme såvel som hos personer, der har haft sygdomme for mange år siden, inklusive i bærere, dvs. en positiv test hos raske individer indikerer kun kontakt med et mikrobielt antigen.

Når man bestemmer sygdommens natur, er det kun overgangen fra en negativ hudtest til en positiv, som observeres i løbet af sygdommen, der har ægte diagnostisk værdi. Derudover tjener reaktionens tur, det vil sige en stigning i sværhedsgraden af ​​dets manifestation under genundersøgelse, også som basis for en mere detaljeret undersøgelse af infektion med dette patogen..

Når du tager nogle lægemidler af kortikosteroidhormoner, immunsuppressiva såvel som i nogle sygdomme (sarkoidose, Hodgkins sygdom og visse tumorer), er det svært at tage højde for resultaterne af allergiske tests, fordi der i disse tilfælde er såkaldt anergi, dvs. et signifikant fald i den samlede hudreaktivitet.

Når der forekommer udslæt hos børn, når et barn lider af en af ​​sygdomme som mæslinger, skoldkopper, kan der også forekomme anergi, og i denne periode, når en Mantoux-test udføres, kan et tuberculinpositivt barn blive midlertidigt tuberkulin-negativt, dvs. et falsk-negativt resultat.


Publikationer Om Årsagerne Til Allergi